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免疫層析分析技術快速檢測谷物中的黃曲霉B1
時間(jian):2014-07-31 17:40:19 作者:管理(li)員 來(lai)源(yuan): 點(dian)擊:1389次

黃曲(qu)霉(mei)毒素(su) B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目(mu)前已知的(de)化學物(wu)質中致癌性最強(qiang)的(de)一種。黃曲(qu)霉(mei)毒素(su) B1 對(dui)(dui)人和若干動物(wu)具有強(qiang)烈的(de)毒性,其毒性作用(yong)主(zhu)要是對(dui)(dui)肝臟的(de)損害(hai)。國家(jia)質檢總局規定黃曲(qu)霉(mei)毒素(su) B1 是大部分食品的(de)必檢項目(mu)之(zhi)一。

本品采用高度(du)特異性的(de)抗(kang)(kang)體(ti)抗(kang)(kang)原反應(ying)及免(mian)疫層析分析技(ji)術,通過(guo)單克(ke)隆(long)抗(kang)(kang)體(ti)競(jing)爭結(jie)合(he) AFB1-BSA 偶(ou)聯物(wu)和樣品中可能含有的(de) AFB1 的(de)原理(li)。試(shi)(shi)劑含有被事先(xian)固定于膜(mo)上測試(shi)(shi)區(T)的(de) AFB1-BSA 偶(ou)聯物(wu)和被膠體(ti)金標記(ji)的(de)抗(kang)(kang) AFB1 單克(ke)隆(long)抗(kang)(kang)體(ti)。

實驗(yan)方(fang)法:

一、樣品(pin)制備

取 5g 以(yi)上(shang)有(you)代表性(xing)樣(yang)(yang)品并粉(fen)碎(sui)過 20 目篩,準確(que)(que)稱取 2.0g 均勻粉(fen)碎(sui)試樣(yang)(yang)于(yu)配套(tao)離心(xin)管(guan)中,再準確(que)(que)加入 4ml 純凈水和(he) 4.0ml 乙酸乙酯(zhi),將瓶塞蓋緊(jin)密(mi)封,充分振蕩 5min。4000rpm 離心(xin) 1min 得上(shang)清液(ye),將上(shang)清液(ye)用(yong)(yong)(yong)吸管(guan)移出(chu) 2.0ml 到(dao)蒸發皿或小玻(bo)璃杯中,用(yong)(yong)(yong)電吹風吹干(gan)上(shang)清液(ye)。根據(ju)樣(yang)(yang)品的種類按以(yi)下規(gui)定的稀釋液(ye)量(liang),用(yong)(yong)(yong)鋁箔袋內配套(tao)吸管(guan)反復沖洗(xi),徹底溶解杯底所有(you)的固(gu)體(ti),此溶解液(ye)為樣(yang)(yang)品提取液(ye)即檢(jian)測(ce)液(ye)。考慮不同樣(yang)(yang)品對黃曲霉毒素 B1 的最高含量(liang)要求,請參(can)考下表進(jin)行用(yong)(yong)(yong)稀釋液(ye)溶解杯底固(gu)體(ti):

二、實驗步驟

 1. 在進行檢測(ce)前先完整閱讀使(shi)用說(shuo)明書(shu),使(shi)用前將試紙卡和待檢樣(yang)本溶解(jie)恢復至室溫;

2. 從原包裝袋中取出試紙卡(ka),打開(kai)后平放在桌面上,請在 1 小(xiao)時(shi)內盡快使用;

3. 用吸管吸取(qu)待(dai)檢樣品溶液,滴加(jia) 3 滴于加(jia)樣孔中(zhong),加(jia)樣后(hou)開始計(ji)時;

4. 結果(guo)應在 10min 內讀(du)取,超過 12min 的(de)時(shi)間判讀(du)無效。

三、結(jie)果(guo)判(pan)定(ding)

1. 陽性:位(wei)(wei)(wei)置(zhi) C 顯(xian)示(shi)出(chu)紅色(se)線(xian)條(tiao),而位(wei)(wei)(wei)置(zhi) T 不顯(xian)色(se)時,或者位(wei)(wei)(wei)置(zhi) C 顯(xian)示(shi)出(chu)紅色(se)線(xian)條(tiao),位(wei)(wei)(wei)置(zhi) T 顯(xian)示(shi)顏色(se)非常(chang)模糊(hu)時,判為陽性。陽性結果表明(ming):AFB1 含量超過樣品允許(xu)量。

2. 陰性:位置(zhi) C 顯示出(chu)紅(hong)色線(xian)(xian)條(tiao),位置(zhi) T 同時(shi)顯示出(chu)紅(hong)色線(xian)(xian)條(tiao),且(qie) T 線(xian)(xian)顏色接近 C 線(xian)(xian)或者深于 C 線(xian)(xian)時(shi),判為陰性。陰性結(jie)果表(biao)明(ming):AFB1 含量低于

樣(yang)品允許量。

3. 無效(xiao):位置 C 不顯示(shi)出(chu)紅(hong)色(se)線(xian)條,而位置 T 顯示(shi)出(chu)紅(hong)色(se)線(xian)條,該試紙(zhi)卡視為無效(xiao)。建議使用(yong)新的試紙(zhi)卡按本說明書要求重新測(ce)試。


本文關鍵詞:免(mian)疫層(ceng)析分(fen)析技術(shu) 快(kuai)速檢測 谷物(wu) 黃曲霉(mei)B1

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