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免疫層析分析技術快速檢測谷物中的黃曲霉B1
時間:2014-07-31 17:40:19 作者:管(guan)理員 來源: 點擊:1169次

黃曲(qu)霉毒(du)素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的(de)(de)化學(xue)物(wu)質(zhi)中致癌性(xing)最強的(de)(de)一(yi)(yi)種。黃曲(qu)霉毒(du)素 B1 對人和若干(gan)動物(wu)具有強烈的(de)(de)毒(du)性(xing),其毒(du)性(xing)作用(yong)主要是對肝臟的(de)(de)損(sun)害。國(guo)家質(zhi)檢(jian)總(zong)局規定黃曲(qu)霉毒(du)素 B1 是大部分食品的(de)(de)必檢(jian)項目之一(yi)(yi)。

本品采用高度特異性的抗(kang)(kang)體抗(kang)(kang)原(yuan)反應及(ji)免疫層析分析技術(shu),通過單克(ke)隆抗(kang)(kang)體競(jing)爭(zheng)結合 AFB1-BSA 偶(ou)(ou)聯物(wu)和樣品中(zhong)可能含(han)(han)有(you)的 AFB1 的原(yuan)理(li)。試(shi)劑含(han)(han)有(you)被事先固(gu)定于膜上測試(shi)區(T)的 AFB1-BSA 偶(ou)(ou)聯物(wu)和被膠體金標記的抗(kang)(kang) AFB1 單克(ke)隆抗(kang)(kang)體。

實驗(yan)方法:

一(yi)、樣品制備(bei)

取 5g 以上有代表性樣(yang)品(pin)并粉碎過 20 目篩,準確(que)稱取 2.0g 均(jun)勻粉碎試樣(yang)于配套離心管中(zhong),再準確(que)加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩(dang) 5min。4000rpm 離心 1min 得(de)上清(qing)液(ye),將上清(qing)液(ye)用(yong)吸管移出 2.0ml 到蒸發皿或小玻(bo)璃(li)杯(bei)中(zhong),用(yong)電吹風吹干上清(qing)液(ye)。根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)的(de)(de)種(zhong)類按以下(xia)規定的(de)(de)稀釋(shi)液(ye)量,用(yong)鋁箔袋內(nei)配套吸管反復沖(chong)洗,徹底(di)(di)溶解(jie)杯(bei)底(di)(di)所(suo)有的(de)(de)固體,此溶解(jie)液(ye)為樣(yang)品(pin)提(ti)取液(ye)即檢測液(ye)。考慮不同樣(yang)品(pin)對(dui)黃曲(qu)霉毒素 B1 的(de)(de)最(zui)高含量要求,請參考下(xia)表進行(xing)用(yong)稀釋(shi)液(ye)溶解(jie)杯(bei)底(di)(di)固體:

二、實驗步驟(zou)

1. 在進行檢(jian)測前先完(wan)整閱讀使用說明書(shu),使用前將(jiang)試(shi)紙卡和待檢(jian)樣本溶解恢復至室溫;

2. 從原包裝袋中取出試紙(zhi)卡(ka),打開(kai)后平放(fang)在(zai)桌面(mian)上,請在(zai) 1 小時內盡(jin)快使(shi)用(yong);

3. 用吸管吸取(qu)待檢(jian)樣品溶液(ye),滴加 3 滴于(yu)加樣孔中,加樣后開始(shi)計時;

4. 結果應在(zai) 10min 內(nei)讀取,超(chao)過 12min 的(de)時間判讀無(wu)效。

三、結果判(pan)定

1. 陽(yang)性(xing):位(wei)置 C 顯示出紅(hong)色(se)線條,而位(wei)置 T 不顯色(se)時(shi),或(huo)者位(wei)置 C 顯示出紅(hong)色(se)線條,位(wei)置 T 顯示顏色(se)非常模糊時(shi),判為陽(yang)性(xing)。陽(yang)性(xing)結果表明:AFB1 含量超(chao)過樣(yang)品允(yun)許量。

2. 陰性(xing):位(wei)置 C 顯示(shi)出紅色(se)線(xian)(xian)(xian)條(tiao),位(wei)置 T 同時(shi)顯示(shi)出紅色(se)線(xian)(xian)(xian)條(tiao),且(qie) T 線(xian)(xian)(xian)顏(yan)色(se)接近(jin) C 線(xian)(xian)(xian)或(huo)者(zhe)深于 C 線(xian)(xian)(xian)時(shi),判為陰性(xing)。陰性(xing)結(jie)果(guo)表明:AFB1 含量低于

樣品允(yun)許量。

3. 無效(xiao):位置(zhi) C 不顯示(shi)出(chu)紅色線(xian)條,而位置(zhi) T 顯示(shi)出(chu)紅色線(xian)條,該試(shi)紙卡視為無效(xiao)。建(jian)議使(shi)用(yong)新的試(shi)紙卡按本說明書要求重新測(ce)試(shi)。


本文關鍵詞:免疫(yi)層析分析技術(shu) 快速檢(jian)測 谷物(wu) 黃曲霉(mei)B1

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