国产一区二区三区在线看麻豆_久久美女免费福利视频_爱啪在线观看一区二区三区_成人三级小说一区二区_成人精品动漫一区二区在线观看_国产午夜在线人之美女-日本_九九久久国产精品视频_九九久久亚洲国产精品大片

【培(pei)養前準備】

在開(kai)始實驗前要制定好實驗計(ji)劃和操(cao)作程序。有關數據(ju)的計(ji)算要事(shi)先做好。根(gen)據(ju)實驗要求，準(zhun)備各(ge)種所(suo)需器材和物品、清(qing)點(dian)無誤(wu)后將(jiang)其放置操(cao)作場所(suo)（培養(yang)室、超(chao)凈臺）內，然后開(kai)始消(xiao)毒(du)。這可以避免開(kai)始實驗后．囚物品不全(quan)往返(fan)拿取(qu)而增加污染機會(hui)。

【操作野消毒】

無(wu)菌培養室(shi)每天都(dou)要(yao)用0.2%的(de)新潔爾滅拖(tuo)(tuo)洗地面(mian)—次(ci)(ci)（拖(tuo)(tuo)布(bu)要(yao)專(zhuan)用）．紫外(wai)線(xian)(xian)照射(she)消(xiao)毒(du)30-50min，超凈工(gong)作(zuo)臺(tai)臺(tai)面(mian)每次(ci)(ci)實驗前要(yao)用75％酒精擦(ca)洗。然后紫外(wai)線(xian)(xian)淌毒(du)30min。在工(gong)作(zuo)臺(tai)面(mian)消(xiao)毒(du)時(shi)切勿將培養細胞(bao)和(he)培養用液(ye)同時(shi)照射(she)紫外(wai)線(xian)(xian)，消(xiao)毒(du)時(shi)工(gong)作(zuo)臺(tai)面(mian)上用品(pin)不(bu)要(yao)過多或重(zhong)疊放置．否(fou)則(ze)會遮擋射(she)線(xian)(xian)降(jiang)低消(xiao)毒(du)效果。—些(xie)操作(zuo)用具如移液(ye)器、廢液(ye)缸(gang)、污物盒(he)、試管架等用75%酒精擦(ca)洗后置于臺(tai)內同時(shi)紫外(wai)線(xian)(xian)消(xiao)毒(du)。

體(ti)外(wai)培養細胞(bao)缺(que)乏抗感染能(neng)力，所以(yi)防止污染是決定培養成功或失敗的首要條件。即便使用設(she)備完善的實(shi)驗室。若實(shi)驗者粗心大意，技術(shu)操作不規范,也會導(dao)致污染。因(yin)而．為在一(yi)切操作中為最大可(ke)能(neng)的保證(zheng)無(wu)菌．每一(yi)項工作都必須(xu)做到(dao)有條不紊和完全靠。

【洗手和著裝】

 原則上和外科手(shou)術相同。平(ping)時(shi)(shi)(shi)僅做(zuo)觀(guan)察不做(zuo)培養操(cao)作(zuo)時(shi)(shi)(shi)，可穿裝(zhuang)細胞培養室內紫(zi)外線照射30min的清潔(jie)(jie)工(gong)作(zuo)服。在(zai)利用超凈臺工(gong)作(zuo)時(shi)(shi)(shi)，因(yin)整個前(qian)臂要(yao)伸入箱內，應著長袖的清潔(jie)(jie)工(gong)作(zuo)服，并于開始操(cao)作(zuo)前(qian)要(yao)用75％酒精消(xiao)毒(du)(du)手(shou)。如(ru)果實驗(yan)過程中(zhong)手(shou)觸及可能污染的物(wu)品和出入培養室都要(yao)重新用消(xiao)毒(du)(du)液洗手(shou)。進(jin)入原代(dai)培養室需徹底洗手(shou)還要(yao)戴口罩、著消(xiao)毒(du)(du)衣(yi)帽。

【火焰消毒】

在無菌(jun)環境進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)或做(zuo)其它無菌(jun)工作時，首先要點燃酒精燈(deng)或煤氣燈(deng)。以(yi)后一切操(cao)作，如按(an)裝吸管帽(mao)、打(da)開或封閉(bi)瓶(ping)口(kou)等，都需(xu)在火(huo)(huo)焰(yan)近處并經過燒灼(zhuo)進(jin)行(xing)。但要注意：金屬(shu)器械不(bu)能在為焰(yan)中(zhong)燒的時間過長，以(yi)防退(tui)火(huo)(huo)，燒過的金屬(shu)鑷要待(dai)冷卻后才能挾取組(zu)織，以(yi)免造(zao)成(cheng)組(zu)織損傷。吸取過營(ying)(ying)養(yang)液(ye)(ye)后的吸管不(bu)能再用火(huo)(huo)焰(yan)燒灼(zhuo)，因(yin)殘留在吸管頭(tou)中(zhong)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)(ye)能燒焦(jiao)形成(cheng)炭(tan)膜，再用時會把有(you)(you)害物(wu)帶入營(ying)(ying)養(yang)液(ye)(ye)中(zhong)。開啟、關閉(bi)長有(you)(you)細胞的培(pei)養(yang)瓶(ping)時，火(huo)(huo)焰(yan)滅菌(jun)時間要短。防止因(yin)溫度(du)過高燒死細胞。另外膠(jiao)塞(sai)過火(huo)(huo)焰(yan)時也不(bu)能時間長，以(yi)免燒焦(jiao)產生有(you)(you)毒氣體，危害培(pei)養(yang)細胞。

【操(cao)作】

進行培養(yang)時，動作要(yao)(yao)準確敏捷，但又不(bu)必太快，以(yi)防空(kong)氣流(liu)動，增加污(wu)染(ran)機會。不(bu)能(neng)用手(shou)觸(chu)(chu)及已(yi)消(xiao)毒(du)器皿，如(ru)(ru)已(yi)接觸(chu)(chu)，要(yao)(yao)用火(huo)焰燒灼消(xiao)毒(du)或(huo)(huo)(huo)取(qu)備品更換。為(wei)拿取(qu)方(fang)便，工作臺面上(shang)的(de)用品要(yao)(yao)有合理的(de)布局，原(yuan)則上(shang)應是右手(shou)使(shi)(shi)用的(de)東西放置(zhi)在右側，左(zuo)手(shou)用品在左(zuo)側，酒精(jing)燈(deng)置(zhi)于中(zhong)央。工作由始至終要(yao)(yao)保持一定順(shun)序性，組織(zhi)或(huo)(huo)(huo)細(xi)胞(bao)(bao)在未(wei)做處理之前(qian)，勿過早暴露(lu)在空(kong)氣中(zhong)。同樣(yang)，培養(yang)液(ye)在未(wei)用前(qian)，不(bu)要(yao)(yao)過早開(kai)(kai)瓶；用過之后如(ru)(ru)不(bu)再(zai)重復使(shi)(shi)用，應立即封閉瓶口直立可增加落菌機會。吸(xi)取(qu)營(ying)養(yang)液(ye)、PBS、細(xi)胞(bao)(bao)懸液(ye)及其(qi)它各(ge)種(zhong)用液(ye)時，均(jun)應分(fen)別使(shi)(shi)用吸(xi)管(guan)，不(bu)能(neng)混用，以(yi)防擴大(da)污(wu)染(ran)或(huo)(huo)(huo)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)交叉污(wu)染(ran)。工作中(zhong)不(bu)能(neng)面向操作野講話或(huo)(huo)(huo)咳嗽，以(yi)免唾(tuo)沫把細(xi)菌或(huo)(huo)(huo)支原(yuan)體帶入工作臺面發生污(wu)染(ran)。操作前(qian)用酒精(jing)擦拭超凈臺面及雙手(shou)。手(shou)或(huo)(huo)(huo)相對較臟的(de)物品不(bu)能(neng)經過開(kai)(kai)放的(de)瓶口上(shang)方(fang)，瓶口最(zui)易污(wu)染(ran)，加液(ye)時如(ru)(ru)吸(xi)管(guan)尖碰(peng)到瓶口，則應將(jiang)吸(xi)管(guan)丟掉。

本文關鍵詞：無菌操作的注意事項