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嘔吐毒素免疫金標速測卡使用說明書
【產品簡介】
嘔吐毒(du)素(Vomitoxin),是一種(zhong)單端(duan)孢霉烯族(zu)毒(du)素,主要由(you)禾谷鐮刀菌和粉紅鐮刀菌產生,化學名稱(cheng)為(wei)脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),容易存在(zai)于各種(zhong)谷物類糧食及加工產品中,污染水平一般為(wei)mg/kg(ppm)級。DON具有很強的細胞毒(du)性。人誤(wu)食DON含量高的食物后,容易導致急性中毒(du)頭昏、腹(fu)脹(zhang)、惡心、嘔吐,以及白(bai)細胞缺乏癥。
本(ben)檢(jian)測(ce)卡(ka)對谷(gu)物(小(xiao)米、玉米、大麥等(deng))及(ji)其制品(蛋糕、餅(bing)干、面包等(deng))中的DON含量(liang)進行快速、定量(liang)檢(jian)測(ce)。不需要任何儀器設備,最低檢(jian)測(ce)限為100 pbb。
【檢測原理】
嘔吐(tu)毒(du)素免(mian)疫(yi)金標速測(ce)卡應(ying)用(yong)競爭抑制(zhi)免(mian)疫(yi)層(ceng)析的(de)原(yuan)理,樣(yang)本中的(de)嘔吐(tu)毒(du)素在側向(xiang)移動的(de)過程中與膠(jiao)體(ti)金標記(ji)的(de)特(te)異(yi)性單(dan)克隆抗體(ti)結(jie)合(he),抑制(zhi)了抗體(ti)和NC膜檢(jian)測(ce)線(xian)上(shang)嘔吐(tu)毒(du)素-BSA偶聯物的(de)結(jie)合(he)。如果(guo)樣(yang)本中嘔吐(tu)毒(du)素含(han)量大于100pbb,檢(jian)測(ce)線(xian)不顯顏色,結(jie)果(guo)為(wei)陽性;反之,檢(jian)測(ce)線(xian)顯紅色,結(jie)果(guo)為(wei)陰性。
【產品組成】
嘔(ou)吐(tu)毒(du)素(su)免疫金標速測卡(40份(fen)/盒);說明(ming)書(1份(fen)/盒);塑(su)料吸管(40個/盒);
【樣品處理】(稀釋因子為5)
準確稱取(qu)1.0 g飼(si)料、谷物、麥芽(ya)樣(yang)(yang)品(pin)進(jin)行粉碎以使75%的(de)(de)樣(yang)(yang)品(pin)可以通過(guo)20目(mu)篩,樣(yang)(yang)品(pin)的(de)(de)大(da)小顆粒與速溶咖啡相(xiang)當。接著(zhu)將粉碎后的(de)(de)樣(yang)(yang)品(pin)放入三(san)角瓶中,加入5 mL甲醇(chun)與水(1:9)的(de)(de)混合液(樣(yang)(yang)品(pin)提取(qu)液),振蕩15 min。靜置(zhi)5min后取(qu)上清(qing)液進(jin)行檢(jian)測分析。取(qu)考慮(lv)不同(tong)樣(yang)(yang)品(pin)對(dui)嘔吐毒素的(de)(de)最高(gao)含量(liang)要求(qiu),可參考下表(biao)在1g樣(yang)(yang)品(pin)中加入樣(yang)(yang)品(pin)提取(qu)液的(de)(de)量(liang)
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樣品(pin)允許(xu)量(ug/kg) |
200 |
300 |
500 |
800 |
1000 |
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1g樣(yang)品(pin)(pin)中加入樣(yang)品(pin)(pin)提(ti)取液的量(ml) |
2 |
3 |
5 |
8 |
10 |
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稀釋因子(zi) |
2 |
3 |
5 |
8 |
10 |
【使用步驟】
(1)測試前請完整閱讀使用說明書,并將未開封的檢測卡和待(dai)檢樣本(ben)溶液回復至(zhi)常(chang)溫;
(2)從(cong)包裝袋中取出檢測(ce)卡后請盡快使用;
(3)將檢測卡平(ping)放,用滴管(guan)吸取(qu)待檢樣(yang)品溶液,滴加3滴(約75 μL) 于加樣(yang)孔中,加樣(yang)后開始計時;
(4)結果應(ying)在(zai)5-8分鐘(zhong)讀取,其他時間(jian)判讀無效;
(5)讀取結果時,檢測卡水平置于(yu)觀察者正面,如(ru)下圖所示。
【結果判斷】
? 陰性(-): T線顯(xian)色(測(ce)(ce)試線,靠近加樣孔一(yi)端),表(biao)明樣品中(zhong)嘔吐(tu)毒(du)素濃度(du)低于檢測(ce)(ce)線或不含嘔吐(tu)毒(du)素殘留。
? 陽性(+): T線無(wu)顯色(se),表(biao)明樣(yang)品中嘔吐毒(du)素(su)濃度高于檢測(ce)線。
? 無效(xiao):未出現(xian)C線(xian),可能(neng)操(cao)作不(bu)當或檢(jian)測(ce)卡(ka)已失效(xiao)。在此情況(kuang)下,應再次(ci)仔細閱讀說明書,并用新(xin)的(de)檢(jian)測(ce)卡(ka)重新(xin)測(ce)試。
【注意事項】
⑴請勿觸摸檢測卡(ka)(ka)中央的白色(se)膜面(mian);請勿使用過期(qi)的檢測卡(ka)(ka)。
⑵本(ben)公司提(ti)(ti)供的(de)滴管請(qing)勿重復使(shi)用;本(ben)公司提(ti)(ti)供的(de)試劑請(qing)勿食用。
⑶若需(xu)直接檢測標準品,請用我方提供(gong)的PBS緩沖液進行配制(zhi)。
⑷自來(lai)水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性(xing)對照。
⑸由(you)于樣(yang)本(ben)的差異,有的檢測線顏色可(ke)能偏淡或偏灰,但只要出現條帶,就(jiu)可(ke)判定為陰性(xing)結(jie)果(guo)。
⑹出現陽性結(jie)果,建議用(yong)本卡復查(cha)一次。氣(qi)質聯用(yong)法(fa)(fa)是真菌毒素(su)檢(jian)測的確(que)證方(fang)法(fa)(fa)。
⑺樣本中(zhong)的固體雜質顆粒會導致假陽性(xing)結果,取樣時棄去肉眼(yan)可見的顆粒部分,有條件時請離心后取上清液(ye)做(zuo)檢(jian)測。
【特異性】
本產品(pin)與黃曲霉(mei)毒素(su)、T-2毒素(su)、玉米(mi)赤霉(mei)烯酮等真菌毒素(su)無交叉反應(ying)。
【精密度】
同時用(yong)本(ben)產品和嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒(he)對包括146份陰性樣(yang)本(ben)和140份陽性樣(yang)本(ben)的(de)286份樣(yang)品進行檢測,結(jie)果表明本(ben)產品與嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒(he)的(de)結(jie)果符合率為95.1%。
【儲存及有效期】
原包(bao)裝在4-30 ℃陰(yin)涼避光干(gan)燥處儲存(cun),有效期為12個月,批(pi)號和(he)有效期見包(bao)裝盒。