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轉基因 Bt Cry1F免疫金標速測卡
使用說明書
【產品簡介】
本(ben)產(chan)品(pin)用于快速檢測植物(wu)葉片和種子等樣(yang)品(pin)中(zhong)的轉(zhuan)基因Bt Cry1F,檢測限為10ppm,整個(ge)檢測過程(cheng)只需要5-10分鐘(zhong),適用于各類企業及檢測機構。
【檢測原理】
轉基因Bt Cry1F免(mian)疫(yi)金(jin)標速測(ce)(ce)(ce)(ce)卡應用雙抗(kang)體(ti)(ti)夾心(xin)免(mian)疫(yi)層析的原理,樣(yang)本中的抗(kang)原在側向(xiang)移動的過(guo)程中與(yu)膠(jiao)體(ti)(ti)金(jin)標記的特(te)異性(xing)單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)(ti)1結(jie)合(he)(he),形成抗(kang)原-抗(kang)體(ti)(ti)復合(he)(he)物,繼續向(xiang)前方流動和NC膜檢測(ce)(ce)(ce)(ce)線(xian)上特(te)異性(xing)單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)(ti)2的結(jie)合(he)(he)形成雙抗(kang)體(ti)(ti)夾心(xin)復合(he)(he)物。如果檢測(ce)(ce)(ce)(ce)線(xian)顯紅色,結(jie)果為(wei)陽性(xing);反之,檢測(ce)(ce)(ce)(ce)線(xian)不顯色,結(jie)果為(wei)陰性(xing)。
【樣品處理】
植物葉片組織:
1. 將植物葉(xie)片組織置于一次性組織提取管(guan)的蓋(gai)子與管(guan)身之間,迅速蓋(gai)住蓋(gai)子,得到圓形葉(xie)片組織。用小剪刀將葉(xie)片置于提取管(guan)的底部。用記(ji)(ji)號筆在(zai)管(guan)壁做好標記(ji)(ji)。
2. 將小剪刀插入管中,旋轉小剪刀攪碎(sui)葉片,持續按壓20~30秒。
3. 加入(ru)0.5mL(約20滴(di))提取緩沖液(ye)。
4. 重復碾(nian)碎步驟使(shi)樣(yang)品與緩沖(chong)液充分接觸混合。拿掉小剪刀(dao)(注意請將小剪刀(dao)清洗(xi)干凈后(hou)使(shi)用,以免不同樣(yang)品間交叉污染)。
提取植物種子:
1. 取(qu)一粒植物種子,壓碎,轉移(yi)到(dao)做好標記的提(ti)取(qu)管中。注意:充分壓碎能夠提(ti)高測試準確度。
2. 加0.5mL(約(yue)20滴)提(ti)取緩沖液溶解。
3. 蓋好提取(qu)管的蓋子,用(yong)力上下振蕩提取(qu)管20~30s,確保樣品與緩沖(chong)液充分混勻(yun)。靜(jing)置等待固(gu)體物質沉淀在管底。
4. 請注意不要(yao)交叉污染(ran),每個樣品采(cai)用單(dan)獨的提取管。
【使用步驟】
測試前(qian)請完整閱讀使用說明書,并將(jiang)試劑(ji)板和待檢樣本溶液(ye)恢復(fu)至常溫。
1. 從包裝(zhuang)袋中取出試劑板后請盡快(kuai)使用(yong);
2. 用滴管吸取待檢樣品溶液,于加樣孔中滴加3滴(約75μL),加樣后開始計時;結果應在5-10分鐘讀取;
3. 讀(du)取結果(guo)時,試劑板水平置于(yu)觀察(cha)者正面(mian),如(ru)下圖所示(shi)。
【結果判斷】
1. 陰性(-): T線(xian)不顯色(se)(測試(shi)線(xian),靠近加樣孔一(yi)端);
2. 陽(yang)性(+): T線顯色(se)肉眼可(ke)見;
3. 無效:未出現C線,可(ke)能操作(zuo)不(bu)當(dang)或試劑(ji)板(ban)(ban)已失(shi)效。在此情況(kuang)下,應再(zai)次仔細閱讀說明書,并用新(xin)的試劑(ji)板(ban)(ban)重新(xin)測(ce)試。
【注意事項】
? 請勿觸摸試(shi)劑板中(zhong)央(yang)的白(bai)色膜面;
? 樣本中的固體雜質顆粒會導(dao)致假陽性(xing)結果,取樣時棄去(qu)肉眼可見的顆粒部分,有條(tiao)件時請(qing)離心后取上清液(ye)做檢測。
【儲存及有效期】
? 原包裝(zhuang)在4-25 ℃陰涼避光干燥處儲存,有效期為12個月。